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首先，为探究被瘙痒激活的rACCPy神经元是否具有功能性抑制作用，研究人员利用c-Fos Tet-Off系统在大鼠双侧rACC中特异性地在“瘙痒标记”神经元中表达hM3Dq-mCherry或仅表达mCherry作为对照。在停用强力霉素后，通过面颊注射5-HT诱发瘙痒，使这些神经元被标记并表达相应蛋白。随后给予CNO以激活hM3Dq，结果发现：重新激活这群原本在瘙痒时活动下降的神经元，可显著减少由5-HT、compound 48/80和氯喹三种不同致痒剂诱发的抓挠发作次数及总抓挠时间。而在未给予CNO时，hM3Dq组与对照组无差异，排除了受体表达本身的影响。
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最后，这表明，rACCPy并非直接抑制瘙痒，而是通过rACCPy → PAGGABA能神经元这一下行通路发挥抑制作用，该环路的激活可有效“踩下瘙痒的刹车”，而其功能减弱则会加剧瘙痒反应。
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